在水产养殖过程中,因药物使用、疾病因素、溶氧、pH值、氨、亚硝酸盐、硫化氢等水质因子以及养殖密度(如高密度称为拥挤胁迫)、饲料的选择与投喂、运输暴露等都会对水产养殖动物造成应激反应。
应激发生后,轻则导致鱼厌食或饵料系数偏高,高则导致鱼发病死亡,因而控制或减少鱼类应激,对于获得高产、稳产至关重要。
本试验旨在验证云顶集团3118acm宁(水产动物专用型)对鳊鱼生长与抗应激能力的影响。
1 材料与方法
1.1 试验鱼及试验设计
试验用鳊鱼(Megalobrama amblycephala)为当年人工繁殖的同一批苗种,购自重庆市荣昌县梅石坝渔场,试验在西南大学水产系室内循环养殖系统中进行。试验前暂养一周,每天早、中、晚饲喂对照
组饲料3次至饱食。试验采用的养殖设施为长方形玻璃缸(总体积0.4m3、水体体积0.2 m3)。养殖试验期间均连续充氧(除投饵期间外)。
试验开始前停饲 24 h。选择体重相近(5.2±0.4)g、体格健壮的幼鱼1200尾,随机分成4组,每组三个缸、每缸100尾,具体分组见表1。每天早、中、晚投喂3次,至饱食,投喂结束后 30 min,吸出池内残
饵及粪便。养殖试验共进行42d,试验期间水温25.0±1.0℃,pH7.5±0.5,溶氧≥5mg/L,氨氮<0.2mg/L,余氯<0.1mg/L。
1.2 试验饲料
饲料由西南大学水产系水产动物繁育和健康养殖研究中心制作。配制饲料前,饲料原料均经粉碎机粉碎并全部过60目筛,按配方要求均匀混合成粉料,在30℃鼓风干燥箱内干燥24 h,置冰箱0℃保存。云顶集团3118acm
宁(水产专用型)产品由北京云顶集团3118acm生物科技有限公司提供。具体配方组成和营养成分分析见表2。
1.3 生长性能相关指标
1.3.1 生长速度
以鱼质量的鲜重变化、增重率和特定生长率等表示生长速度。增重率( % ) = [( Wt-W0) /W0]×100%;特定生长率( %/d )=[(LnW t-LnWo) /d]×100%,W0和Wt分别表示养殖开始和结束时的鱼体质量
(g)。
1.3.2 饲料利用效率
以饲料系数和蛋白效率表示,饲料系数=饲料投喂量 / 鱼体增重量;蛋白效率=( Wt-W0) /F×P%,F指饲料消耗量,P%指饲料蛋白质含量。
1.4 抗应激机能测定
1.4.1 运输应激
试验设计 鳊鱼养殖试验结束后停止喂食24 h。AL1、AL2和AL3组的各重复缸中分别取出5尾鱼放入鱼苗运输袋中充入纯氧并打包;对照组则各重复缸中分别取出10尾,每个运输袋中放入5尾鳊鱼充入纯氧
并打包(具体见表3),用皮卡车运输2 h。运输后立即将鱼快速深度麻醉后采集血样。运输过程中皮卡车平均速度为50~60 km/h。
1.4.2 暴露应激
鱼的取样方法与运输应激相同,取样后置于空气中同等养殖温度下暴露3min。
取血、样品处理及测定与运输应激相同。
1.4.3 嗜水气单胞菌攻毒试验
嗜水气单胞菌(BYK-038)毒株来源于上海海洋大学农业部渔业动植物病原库,病原菌按病原库推荐培养方法在28°C条件下培养24h后,无菌生理盐水洗涤后,置离心机中1000 g条件下离心10min。去
上清液,用无菌生理盐水调整细菌浓度至5×107 cfu。按0.10mL/尾的剂量注射到鳊鱼腹腔,每个试验组30尾鱼,10尾/重复,其后连续7天记录其死亡率。
1.5 试验数据的统计分析
采用SPSS17.0 统计软件对数据进行统计学分析,先对数据作单因素方差分析(ANOVA),处理间若有显著差异,再作Duncan's多重比较,P<0.05表示差异显著。
2 试验结果
2.1 对生产性能的影响
云顶集团3118acm宁以100~200g/t剂量添加后,鳊鱼的生长性能指标如表4所示。从表中可以看出:1)云顶集团3118acm宁显著提高了鳊鱼的增重率和特定生长率(P<0.05),提高幅度分别为21.8%~30.9%、11.7%~15.9%,
但各AL组之间无显著差异(P>0.05);2)蛋白效率也因云顶集团3118acm宁的补充而显著提高了25.8%~34.0%,并随着云顶集团3118acm宁补充量的增加而呈现逐渐提高的趋势,AL3组较对照组和AL1组均有显著提高(P<0.05);
3)而饲料系数则与蛋白效率呈现出完全相反的变化规律,有效降低20.6%~25.3%;4)云顶集团3118acm宁的补充对鳊鱼成活率较对照组均有显著提高(P<0.05)。
2.2 运输应激对鳊鱼的影响
2.2.1 鳊鱼运输后血清皮质醇激素含量的变化
第21d:经过2h的运输后,除阳性对照组有1尾死亡外,阴性对照、AL1、AL2和AL3组均未出现死亡。在运输的过程中,阳性对照组鱼在氧气袋中,水波的动荡下表现出烦躁不安,激烈游动,用头不断冲撞
袋壁,试图逃离这种环境。而AL1、AL2和AL3组鳊鱼在运输初期也表现出窜出水面等较激烈反应,持续约15~20min即恢复平静,静卧袋底或轻轻游动。运输结束后,皮质醇激素含量检测结果表明,阳性对照组、
AL1、AL2和AL3组的鱼血清皮质醇激素含量较阴性对照组均显著提高(P<0.05),但AL1、AL2和AL3组的血清皮质醇激素含量比阳性对照组显著降低(P<0.05)(见表5)。
第42d:其趋势与第21d相同。
2.2.2 鳊鱼运输后血清蛋白和酶活性的变化
第21d:对2h运输应激后鳊鱼血清总蛋白(TP)和白蛋白(AP)测定表明,AL1、AL2、AL3和阳性对照组鱼血清TP和AP均较阴性对照组显著提高(P<0.05),但AL1、AL2和AL3的TP和AP较阳性对照组显
著降低(P<0.05)。
阳性对照组的鳊鱼血清谷丙转氨酶(GPT)和碱性磷酸酶(ALT)较阴性对照组显著提高(P<0.05),但AL2和AL3的血清GPT和ALT与阴性对照组相比无显著差异(P>0.05)。
第42d:各组间TP、AP、GPT和ALT变化趋势与第21d基本一致。
2.2.3 鳊鱼运输后血清中其它几种物质含量的比较
第21d:从表5中可以看出,除AL3外,运输组的鱼血糖(GLU)与阴性对照相比有显著增加(P<0.05),但均显著低于阳性对照组(P<0.05)。
阳性对照组的血清甘油三酯(TG)和血清总胆固醇(TC)较阴性对照组显著提高(P<0.05),云顶集团3118acm宁补充组的血清TG和TC则与阴性对照组无显著差异(P>0.05)。
第42d:GLU在各组间的变化趋势与第21d同;云顶集团3118acm宁补充组的血清TG和TC与阴性对照组无显著差异(P>0.05)。
2.3 鳊鱼暴露后血清中其它几种物质含量的比较
第42d:从表6中可以看出,鳊鱼暴露应激血清学变化呈现出与运输应激几乎一致的变化规律,表明饲料中添加云顶集团3118acm宁对鳊鱼具有很好的抗暴露应激作用。
2.4 细菌攻毒后成活率
未经嗜水气单胞菌攻毒的阴性对照组在观察的7天内未出现死亡。其余各组从第2d开始出现死亡,除阳性对照和AL2组外,各组至第5d后停止死亡。AL1、AL2和AL3组的鳊鱼成活率分别为73%,66%和70%,
均显著高于阳性对照组鳊鱼成活率(50%)。
3 小结
3.1 云顶集团3118acm宁对鳊鱼生产性能的影响
云顶集团3118acm宁的补充显著提高了鳊鱼的增重率和特定生长率,但100、150和200g/t的补充量之间没有显著差异;云顶集团3118acm宁的补充能显著提高鳊鱼对饲料蛋白的利用效率,且随补充量的增加而提高,饲料系数则与蛋
白效率相反,呈逐步降低趋势;云顶集团3118acm宁补充组的鳊鱼成活率较对照组显著提高。
3.2 云顶集团3118acm宁对鳊鱼运输应激的缓解作用
3周和6周养殖后均进行了运输应激,阳性对照组的鳊鱼血清皮质醇、白蛋白、血清总蛋白和血糖含量等指标均显著高于阴性对照组,各云顶集团3118acm宁添加组的鳊鱼血清相应指标也基本均显著高于阴性对照组,但
与较阳性对照组比较则显著降低。阳性对照组的鳊鱼经过运输应激后,多项生化指标如谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、甘油三酯和胆固醇等均呈较大幅度上升,而云顶集团3118acm宁补充组则上升幅度减小,甚至与阴性对照组
无显著差异。表明饲料中补充云顶集团3118acm宁后,在运输应激中具有很好的抗应激效果。
3.3 云顶集团3118acm宁对鳊鱼暴露应激的缓解作用
3周和6周养殖试验之后的3min暴露应激发现,云顶集团3118acm宁补充组的鳊鱼血清皮质醇激素、白蛋白、血清总蛋白和血糖含量等指标比阴性对照组均显著提高,但较阳性对照组有显著降低(P<0.05)。阳性对照
组的鳊鱼经过暴露应激后,多项生化指标如谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、甘油三酯和胆固醇等均呈较大幅度上升,而云顶集团3118acm宁补充组则上升幅度减小,甚至与阴性对照组无显著差异。表明补充云顶集团3118acm宁对抗暴露应激
效果良好。
3.4 云顶集团3118acm宁对鳊鱼抗病能力的影响
经嗜水气单胞菌攻毒后,各组鳊鱼均出现了死亡,成活率较阴性对照组均显著降低。但与此同时,云顶集团3118acm宁补充组的鳊鱼攻毒后成活率相比阳性对照组显著提高,表明云顶集团3118acm宁能显著提高鳊鱼的抗病能力。
(西南大学水产动物繁育和健康养殖研究中心 唐冬梅 黄玉萍 郑宗林)