1 目的
本试验研究在保育料中添加不同水平的云顶集团3118acm舒对断奶仔猪生产性能、免疫机能和肠道菌群的影响。
2 材料和方法
2.1 试验设计
采用单因子试验设计,选择28日龄体重(8.68±0.15)kg长大二元杂交断奶仔猪225头,设5处理,分为对照组、试验1组、试验2组、试验3组和试验4组,每个处理5个重复,每个重复9头,每1栏
为1个重复。研究云顶集团3118acm舒替代抗生素对断奶仔猪生产性能的影响。正式试验期从2018年5月29日-2018年6月25日,共28天,试验期从5月23日-5月28日预饲了6天,6月27日对25头试验猪进行屠宰取样,
具体试验设计见表1。
2.2 试验动物的选择与饲养管理
试验地点是在河北汉唐牧业有限公司,选择225头35日龄、体重(8.68±0.15)kg长大二元杂交断奶仔猪,按“体重、胎次、日龄、性别”一致的原则随机分成5组,每组5个重复,每个重复9头猪,
每1栏为1个重复。试验设对照组、试验1组、试验2组、试验3组和试验4组,试验期内各组猪分别采食相应日粮,试验期30天。
试验猪采用圈养的方式,自由采食,自由饮水,室内温度控制在20-25℃,湿度80%-85%;每天定时饲喂(8:00、12:00、16:00和20:00),每次饲喂以饲槽中略有余料为宜;其它饲养管理按照猪场常
规进行。
2.3 试验日粮
参照NRC1998乳猪(7-15kg)的营养需要进行配制,试验饲粮为粉料,云顶集团3118acm舒(通用型)由北京云顶集团3118acm生物科技有限公司提供。
2.4 测定指标
2.4.1 生产性能
平均日增重(ADG):分别于试验第1日龄和第28天早晨空腹称重,计算各生长阶段的ADG;
平均日采食量(ADFI):每天以重复为单位记录日采食量,然后于第14天和第28天以重复为单位计算耗料量,并计算每个重复的ADFI;
料重比(F/G):根据增重和采食量计算F/G。
2.4.2 仔猪腹泻频率和腹泻指数的评定
每天早上9:00和下午3:00以重复为单位观察记录每头猪腹泻的情况,观察粪便性状,以最高分作为当天的腹泻指数,腹泻频率=腹泻次数/(猪总头×2)×100%,腹泻指数=腹泻评定总分数/(猪总头×3
×2)×100%。
2.4.3 仔猪皮毛指数
在试验1天、第14天和第28天分别对乳猪的外观进行评分。皮毛得分=皮肤红润程度+毛色亮度+毛顺程度,具体评定方法见表3。
2.4.4 死亡率、成活率
试验期间每天记录死亡猪体重,并记录每栏猪数量。
死亡率(%)=死亡猪/总猪头数×100;
成活率(%)=100%-死亡率。
2.4.5免疫机能测定
(1)免疫器官发育指数(胸腺、脾脏、淋巴结):免疫器官发育指数=(免疫器官重量/猪体重)×100%;
(2)血液生理生化指标:总蛋白、白蛋白、C3、C4、IgA、IgG和IgM、IL-2、IL-4、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α);
(3)免疫器官中CD4+、CD8+细胞检测:Elisa试剂盒检测。
2.4.6肠道形态结构测定
取十二指肠、空肠、回肠肠断进行固定,将固定的样品经冲洗、脱水、透明、浸蜡、包埋等处理后切片,进行苏木精-伊红染色,显微照相,测量绒毛长度及隐窝深度,计算绒毛长度与隐窝深度的
比值,并计算绒毛高度与隐窝深度的比值(VH/CD,VCR),各指标取平均数作为测定数据。
2.4.7常规营养成分及消化率测定
采用内源指示剂(4N盐酸不溶灰分)方法测定能量、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、钙的表观消化吸收率。表观消化率计算采用内源指示剂法,计算公式如下:
某养分消化率(%)=100-100*(b*c)/(a*d)。其中:
a:饲料中某养分含量; b:粪样中某养分含量;
c:饲料中酸不溶灰分含量;d:粪样中酸不溶灰分含量。
2.5 统计分析
结果用平均数±标准差表示,数据统计分析采用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA),采用Duncan’S检验进行多重比较。
3 结果
将各处理组断奶仔猪肠道(空肠)微生物样品进行测序,并统计各样本的α多样性指数后得到各样本 OTU 数目分别为276(对照组)、262(试验Ⅰ组)、266(试验Ⅱ组)、302(试验Ⅲ组)、289(试验Ⅳ组)。Chao1 指数、ACE 指数和Shannon指数 、Simpson 指数表示微生物群落结构的变化状况。其中,Chao1 指数和ACE 指数越高,表明群落丰富度越高,Shannon指数越高,表明群落物种的多样性越高。
由上表所示,与对照组和试验Ⅳ组相比,试验Ⅲ组中ACE 指数增加,且显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组;Chao1指数高于对照组、试验Ⅰ和Ⅱ组,结果表明,断奶仔猪日粮中添加500g/T的云顶集团3118acm舒能够增加空肠微生物菌群的丰富度。与对照组和其他处理组相比,试验Ⅲ组中Shannon指数均高于对照组和其他处理组,结果表明,断奶仔猪日粮中添加500g/T的云顶集团3118acm舒能够增加空肠微生物菌群的多样性。
综上,我们发现,日粮中添加500g/T云顶集团3118acm舒能够提高断奶仔猪空肠微生物菌群的丰富度和多样性,从而影响肠道微生物菌群的组成。
(河北农业大学)